Человеческий лейкоцитарный антиген B27
Иммуногенетический маркер HLA-B27
Дифференциальная диагностика аутоиммунных заболеваний

HLA typing, flow cytometry (flow cytofluorometry)
Ankylosing spondylitis Histocompatibility Antigen
Ankylosing spondylitis Human Leukocyte Antigen

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Как правильно подготовиться к исследованию?

Исключить из рациона алкоголь в течение 24 часов до исследования.
Не принимать пищу в течение 12 часов до исследования.
Полностью исключить прием лекарственных препаратов в течение 24 часов перед исследованием (по согласованию с врачом).
Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 24 часов до исследования.
Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Антиген HLA-B27 – это специфический белок, обнаруживаемый на поверхности иммунных клеток. Он относится к белкам главного комплекса гистосовместимости человека, который обеспечивает различные иммунные реакции. Носительство антигена HLA-B27 ассоциировано с повышенным риском развития заболеваний из группы серонегативных спондилоартритов. Так, этот антиген может быть выявлен у 90-95% пациентов с анкилозирующим спондилоартритом (болезнь Бехтерева), 75% пациентов с реактивным артритом (синдром Рейтера), 50-60% пациентов с псориатической артропатией, 80-90% пациентов с ювенильным анкилозирующим спондилоартритом и 60-90% пациентов с энтеропатическим артритом. Наличие антигена HLA-B27 у пациентов с другими заболеваниями суставов (подагра, ревматоидный артрит, септический артрит) не превышает 7-8%. Учитывая эту особенность, выявление антигена HLA-B27 имеет большое диагностическое значение в клинике ревматологических болезней.

Определение антигена HLA-B27 имеет наибольшее значение при диагностике раннего анкилозирующего спондилоартрита. В большинстве случаев между появлением первых признаков заболевания и постановкой окончательного диагноза проходит 5-10 лет. Это связано с тем, что основным диагностическим критерием заболевания являются рентгенологические признаки сакроилеита, который развивается лишь после нескольких лет воспалительного процесса в крестцово-подвздошных суставах. Пациенты с жалобами на боль в спине без радиологических признаков сакроилеита фактически в поле зрения ревматолога не попадают. Обнаружение HLA-B27 в такой ситуации может оказаться достаточным основанием для направления пациента к узконаправленному специалисту.

Определение антигена HLA-B27 показано при обследовании пациента с жалобами на боль воспалительного характера в спине при отсутствии радиологических признаков сакроилеита или при обследовании пациента с асимметричным олигоартритом.

Наличие HLA-B27 связано с повышенным риском внесуставных проявлений анкилозирующего спондилоартрита. Наибольшее значение имеют ассоциации антигена HLA-B27 и острого переднего увеита, недостаточности аортального клапана, острого лейкоза, IgA-нефропатии и псориаза. HLAB27 – позитивные пациенты более подвержены риску туберкулеза и малярии. С другой стороны, присутствие HLA-B27 играет и определенную «защитную» роль: некоторые вирусные инфекции (грипп, герпес-вирусная инфекция 2-го типа, инфекционный мононуклеоз, гепатит С и ВИЧ) протекают в более легкой форме у носителей HLA-B27.

Определение антигена HLA-B27 проводят для прогнозирования осложнений ревматоидного артрита. Наличие HLA-B27 связано с трехкратным увеличением риска атланто-аксиального подвывиха.

Для определения антигена HLA-B27 могут быть использованы различные лабораторные методы: лимфоцитотоксический тест, методы молекулярной диагностики (ПЦР), иммуноферментный анализ (ИФА) и метод проточной цитометрии. Метод проточной цитометрии является быстрым и надежным способом выявления антигена HLA-B27. При этом он имеет некоторые ограничения, которые следует учитывать при интерпретации результата. Так, моноклональные антитела к антигену HLA-B27, используемые в тесте, не являются абсолютно специфичными, но также могут реагировать и с другими антигенами семейства HLA-B(в первую очередь – HLA-B7, и в меньшей степени – HLA-B40, 73, 22, 42, 44). Учитывая эту особенность, во избежание диагностических ошибок современные протоколы определения антигена HLA-B27 используют двойные антитела, позволяющие дифференцировать антиген HLA-B27 с другими антигенами семейства HLA-B. Такой подход увеличивает специфичность и чувствительность теста до 97,6 и 98,8% соответственно.

Несмотря на наличие стойкой ассоциации атигена HLA-B27 и риска развития спондилоартритов, положительный результат теста не всегда отражает реальный риск заболевания у конкретного пациента. Это связано с тем, что антиген HLA-B27 представлен 49 различными вариантами, характеризующимися различной степенью ассоциации с этой группой заболеваний. Так, вариант HLA-B2708 имеет наибольшую ассоциацию с болезнью, а варианты HLA-B2706 и HLA-B2709, по-видимому, вовсе не связаны с риском заболевания. Около 7-8% здоровых людей европейской популяции являются носителями антигена HLA-B27. При интерпретации положительного результата могут помочь дополнительные данные о наследственности пациента.

Следует отметить, что существуют и другие, как наследственные, так и приобретенные факторы риска развития серонегативных спондилоартритов. Отсутствие HLA-B27 не противоречит диагнозу «анкилозирующий спондилоартрит». В таком случае анкилозирующий спондилоартрит классифицируется как HLAB27-негативный.

Для чего используется исследование?

Для дифференциальной диагностики суставного синдрома (серонегативных спондилоартритов, ревматоидного и септического артрита, подагры и других);
для скрининга, диагностики и прогноза анкилозирующего спондилоартрита;
для оценки риска развития атлантоаксиального подвывиха при ревматоидном артрите.

Когда назначается исследование?

При суставном синдроме: асимметричный олигоартрит, особенно в сочетании с болью в поясничной области воспалительного характера (утренняя скованность более 1 часа, улучшение при физической нагрузке, ухудшение в ночное время суток) и признаки энтезита;
при отягощенном наследственном анамнезе по анкилозирующему спондилоартриту;
при ревматоидном артрите.

Наличие антигена HLA-B27:

наблюдается у 90-95% пациентов с анкилозирующим спондилоартритом и ювенильным анкилозирующим спондилоартритом, а также у 60-90% с реактивным артритом и 50% с псориатической артропатией;
наблюдается у 7-8% здоровых людей европейской популяции.

Отсутствие антигена HLA-B27:

наблюдается у 10% пациентов с анкилозирующим спондилоартритом (HLAB27-негативный спондилоартрит);
наблюдается у 92-93% людей европейской популяции.

Выявление антигена HLA-B27 увеличивает риск развития какого-либо заболевания из группы спондилоартритов в 20 раз;
отсутствие антигена HLA-B27 не противоречит диагнозу «анкилозирующий спондилоартрит».

Кто назначает исследование?

Ревматолог, хирург, врач общей практики, мануальный терапевт.

HLA-B27: друг или враг?

Сегодня предлагаю обсудить роль HLA-B27 в развитии спондилоартритов. Довольно часто вы, уважаемые читатели, спрашиваете об этом анализе 🙂 Спрашиваете - отвечаем…

Было отмечено, что среди индейцев HLA-B27 антиген встречается у 50% в популяции, а анкилозирующий спондилит всего лишь у 2-5%. В Японии антиген HLA-B27 встречается только у 1% популяции, а анкилозирующий спондилит диагностируется в некоторых районах аж у 25% населения. Почему же так происходит?

В целом распространенность анкилозирующего спондилоартрита в общей популяции составляет 1-2%, но возрастает в 10 раз у родственников больных, являющихся носителями антигена HLA-B27.

Существует мнение о прямом участии HLA-B27 в развитии спондилоартритов. Сейчас известно более 9-ти субтипов этого антигена. Например, у населения Чукотки превалирует 5-й субтип HLA-B27, среди них преобладают анкилозирующий спондилоартрит, болезнь и синдром Рейтера; среди негров ЮАР в основном встречается 3-й субтип антигена HLA-B27, а случаи выявления анкилозирующего спондилоартрита довольно редки.

Был проведен эксперимент на трансгенных мышах, которым был перенесен HLA-B27 человека. В ходе эксперимента было отмечено, что следующие клинические проявления преобладали у самцов: воспаление кишечника, синовит задних лапок, спондилит, орхит, увеит, изменение кишечной микрофлоры. Однако при содержании в стерильных условиях у этих животных НЕ развивался спондилоартрит. Следовательно, кроме генетических факторов, определённое значение имеют и факторы внешней среды.

Кроме того, есть несомненные доказательства наличия инфекционных аспектов при спондилоартритах, например, обнаружение антигенов инфекционных агентов в суставной жидкости. Основные гипотезы возникновения спондилоартитов следующие:

«Гипотеза перекрестной толерантности или молекулярной мимикрии». Существует сходство между микробным антигеном (клебсиелла) и HLA-B27 антигеном, а поэтому в организме развивается иммунный ответ как на инфекцию, так и на органы и ткани самого организма - аутоагрессия.
Компоненты микроба клебсиеллы могут встраиваться в HLA-B27 антиген, извращая иммунный ответ и вызывая аутоагрессию.
«Теория одного гена». В норме антигены гистосовместимости (HLA) I класса взаимодействуя с белками микроорганизма представляют (презентуют) его Т-лимфоцитам, ответственным за формирование иммунного ответа на инфекцию. При изменении этих взаимоотношений и возникает болезнь.

Кроме того, также отмечена связь спондилоартритов с другими антигенами HLA системы: В13, В36, DR3, CW3.

Как сдать анализ? Специальной подготовки к сдаче анализа не требуется. HLA-B27 - это качественный анализ, результат представляют в форме «обнаружен» (+) или «не обнаружен» (-) (то есть не в цифрах). Выявление HLA-B27 при наличии клинических проявлений значительно увеличивает вероятность наличия спондилоартрита у пациента. Отсутствие HLA-B27 антигена значительно снижает вероятность этого диагноза. Однако в любом случае результат должен интерпретировать врач.

Определение аллели 27 локуса В (HLA B 27)

Спондилоартриты – это группа воспалительных заболеваний осевого скелета, имеющих выраженную генетическую направленность. К ним относится анкилозирующий спондилоартрит (болезнь Бехтерева), реактивный артрит (синдром Рейтера), псориатическая артропатия и некоторые другие заболевания. Большинство пациентов со спондилоартритами являются носителями определенной аллели локуса B главного комплекса гистосовместимости человека – HLA-B27. Для скрининга, диагностики, а также прогноза спондилоартритов проводят генетическое исследование (типирование), позволяющее выявить наличие или отсутствие аллели HLA-B27.

Для дифференциальной диагностики суставного синдрома (серонегативных спондилоартритов, ревматоидного и септического артрита, подагры и других).
Для скрининга, диагностики и прогноза анкилозирующего спондилоартрита.
Для оценки риска развития атлантоаксиального подвывиха при ревматоидном артрите.

При отягощенном наследственном анамнеза по анкилозирующему спондилоартриту.

При ревматоидном артрите.

встречается у% пациентов с анкилозирующим спондилоартритом и ювенильным анкилозирующим спондилоартритом,
у% пациентов с реактивным артритом,
у 50 % с псориатической артропатией,
у 7-8 % людей европейской популяции.

наблюдается у% людей европейской популяции,
у 10 % пациентов с анкилозирующим спондилоартритом (HLA-B27-негативный спондилоартрит).

Что может влиять на результат:

Гемолиз лимфоцитов образца крови приводит к ложноотрицательному результату.

Подготовка к исследованию: Не курить в течение 30 минут до сдачи крови.

Генетическое исследование на носительство антигена тканевой совместимости HLA- В27

Основные показания к генетическому исследованию на носительство антигена тканевой совместимости HLA-B27:

Дифференциальная диагностика артритов
Подозрение на анкилозирующий спондилит, реактивный артрит, болезнь Рейтера
Повторяющийся увеит

Подробнее о некоторых исследованиях:

Телефон нашей клиники: .

Консультант клиники подберет Вам удобный день и час визита к врачу.

Клиника работает 7 дней в неделю с 9:00 до 21:00.

Если у вас нет возможности приехать в клинику на повторную консультацию, можно получить консультацию врача по skype за ту же стоимость.

Если ранее были выполнены какие-либо исследования, обязательно возьмите на консультацию их результаты. Если исследования выполнены не были, мы рекомендуем и выполним их по результатам осмотра, что позволит избежать лишних исследований и сэкономить средства.

Что такое HLA и зачем нужно типирование по HLA

Взаимозаменяемость однотипных тканей разных людей называется гистосовместимостью (от греч. hystos - ткань ).

Гистосовместимость важна в первую очередь для пересадки органов и тканей другому человеку. Простейший пример - переливание крови, для которого нужно совпадение донора крови и реципиента (получателя) по системе AB0 и резус-фактору. Первоначально (в 1950-е годы) для пересадки органов ориентировались только на совместимость по эритроцитарным антигенам АВ0 и Rh. Это несколько улучшало выживаемость, но все равно давало слабые результаты. Перед учеными встала задача придумать что-то более действенное.

Что такое MHC и HLA

Чтобы избежать отторжения пересаженной ткани, органа или даже красного костного мозга, ученые стали разрабатывать систему генетического сходства у позвоночных животных и человека. Она получила общее название - (англ. MHC, Major Histocompatibility Complex ).

Обратите внимание, что MHC является главным комплексом гистосовместимости, то есть он не единственный! Есть и другие системы, значимые для трансплантологии. Но в медвузах их практически не изучают.

Поскольку реакции отторжения осуществляются иммунной системой, то Главный комплекс гистосовместимости напрямую связан с клетками имунной системы, то есть с лейкоцитами . У человека главный комплекс гистосовместимости исторически называется Человеческим лейкоцитарным антигеном (обычно везде используется английское сокращение - HLA, от Human Leucocyte Antigen ) и кодируется генами, расположенными в 6-й хромосоме.

Напомню, что антигеном называется химическое соединение (обычно белковой природы), которое способно вызывать реакцию иммунной системы (образование антител и др.), ранее я уже более подробно писал об антигенах и антителах.

Система HLA представляет собой индивидуальный набор различного типа белковых молекул, находящихся на поверхности клеток. Набор антигенов (HLA-статус) уникален для каждого человека.

К первому классу МНС относятся молекулы типов HLA-A, -B и -C. Антигены первого класса системы HLA находятся на поверхности ЛЮБЫХ клеток. Для гена HLA-А известны около 60 вариантов, для HLA-B - 136, а для гена HLA-С - 38 разновидностей.

Расположение генов HLA в 6 хромосоме.

Источник рисунка: http://ru.wikipedia.org/wiki/Человеческий_лейкоцитарный_антиген

Представителями МНС второго класса являются HLA-DQ, -DP и -DR. Антигены второго класса системы HLA находятся на поверхности только некоторых клеток ИМУННОЙ системы (в основном это лимфоциты и макрофаги ). Для транплантации ключевое значение имеет полная совместимость по HLA-DR (по другим HLA-антигенам отсутствие совместимости менее значимо).

HLA-типирование

Из школьной биологии надо помнить, что каждый белок в организме кодируется каким-либо геном в хромосомах, поэтому каждому белку-антигену системы HLA соответствует свой ген в геноме (наборе всех генов организма ).

HLA-типирование - это выявление разновидностей HLA у обследуемого. У нас есть 2 способа определения (типирования) интересующих нас антигенов HLA:

1) с помощью стандартных антител по их реакции «антиген-антитело » (серологический метод, от лат. serum - сыворотка ). С помощью серологического метода мы ищем белок-антиген HLA. HLA-антигены I класса для удобства определяют на поверхности Т-лимфоцитов, II класса - на поверхности В-лимфоцитов (лимфоцитотоксический тест ).

Схематическое изображение антигенов, антител и их реакции.

Источник рисунка: http://evolbiol.ru/lamarck3.htm

Серологический метод имеет много недостатков:

нужна кровь обследуемого человека для выделения лимфоцитов,
некоторые гены неактивны и не имеют соответствующих белков,
возможны перекрестные реакции с похожими антигенами,
искомые HLA-антигены могут быть в слишком низкой концентрации в организме или же слабо реагировать с антителами.

2) с помощью молекулярно-генетического метода - ПЦР (полимеразной цепной реакции ). Мы ищем участок ДНК, который кодирует нужный нам антиген HLA. Для этого метода годится любая клетка организма, имеющая ядро. Зачастую достаточно взять соскоб со слизистой оболочки рта.

Наиболее точным является именно второй метод - ПЦР (оказалось, что некоторые гены системы HLA можно выявить только молекулярно-генетическим методом). HLA-типирование одной пары генов стоит 1-2 тыс. рос. рублей. При это сравнивают имеющийся вариант гена у пациента с контрольным вариантом этого гена в лаборатории. Ответ может быть положительным (совпадение найдено, гены идентичны) или отрицательным (гены разные). Для точного выяснения номера аллельного варианта обследуемого гена может понадобиться перебрать все возможные варианты (если помните, то для HLA-B их 136). Однако на практике никто не проверяет все аллельные варианты интересующего гена, достаточно подтвердить наличие или отсутствие только одного или нескольких наиболее значимых.

Итак, молекулярная система HLA (Human Leucocyte Antigens ) кодируется в ДНК короткого плеча 6-й хромосомы. Там находится информация о белках, расположенных на клеточных мембранах и предназначенных для распознавания своих и чужеродных (микробных, вирусных и др.) антигенов и для координации клеток иммуннитета. Таким образом, чем больше сходства между двумя людьми по системе HLA, тем больше вероятность долгосрочного успеха при пересадке органа или ткани (идеальный случай - пересадка от однояйцевого близнеца). Однако изначальный биологический смысл системы MHC (HLA) состоит не в иммунологическом отторжении пересаженных органов, а заключается в обеспечении передачи белковых антигенов для распознавания различными разновидностями Т-лимфоцитов , ответственных за поддержание всех видов иммунитета. Определение HLA-варианта называется типированием.

В каких случаях проводят HLA-типирование?

Это обследование не является рутинным (массовым) и выполняется для диагностики только в сложных случаях:

оценка риска развития ряда заболеваний с известной генетической предрасположенностью,
выяснение причин бесплодия, невынашивания беременности (привычных выкидышей), иммунологической несовместимости.

HLA-B27

Типирование на HLA-B27 является, пожалуй, самым известным из всех. Этот антиген относится к MHC-I (молекулам главного комплекса гистосовместимости 1-го класса ), то есть находится на поверхности всех клеток.

Согласно одной из теорий, молекула HLA–B27 хранит на себе и передает T-лифоцитам микробные пептиды (белковые микрочастицы), вызывающие артрит (воспаление суставов), что приводит к аутоиммунному ответу.

Молекула В27 способна участвовать в аутоиммунном процессе, направленном против собственных тканей организма, богатых коллагеном или протеогликанами (соединение белков с углеводами). Аутоиммунный процесс запускается бактериальной инфекцией. Наиболее частые бактериальные возбудители таковы:

клебсиелла пневмонии,
бактерии кишечной группы: сальмонелла, иерсиния, шигелла,
хламидия (Chlamidia trachomatis).

У здоровых европейцев антиген HLA-B27 встречается всего в 8% случаев. Однако его наличие резко увеличивает (до 20-30%) шансы заболеть ассиметричным олигоартритом (воспаление нескольких суставов ) и (или) получить поражение крестцово-подвздошного сочленения (воспаление соединения между крестцом и тазовыми костями ).

Установлено, что HLA-B27 встречается:

у больных анкилозирующим спондилоартритом (болезнью Бехтерева) в 90-95% случаев (это воспаление межпозвонковых суставов с последующим сращением позвонков),
при реактивных (вторичных) артритах в% (аутоиммунно-аллергическое воспаление суставов после некоторых мочеполовых и кишечных инфекций),
при болезни (синдроме) Рейтера в 70-85% (является разновидностью реактивного артрита и проявляется триадой, состоящей из артрита + воспаления мочевыводящего канала + воспаления слизистой оболочки глаз),
при псориатическом артрите в 54% (артрит при псориазе),
при энтеропатических артритах в 50% (артриты, связанные с поражением кишечника).

Если антиген HLA-B27 не обнаружен, болезнь Бехтерева и синдром Рейтера маловероятны, но в сложных случаях полностью исключить их все равно нельзя.

Если же у вас присутствует HLA-B27, советую вовремя лечить бактериальные кишечные инфекции и избегать половых инфекций (особенно хламидиоза), иначе с высокой вероятностью придется стать пациентом ревматолога и лечить воспаление суставов.

HLA-типирование для оценки риска сахарного диабета

Определенные разновидности HLA-антигенов чаще остальных встречаются у больных сахарным диабетом, а другие HLA-антигены - реже. Ученые пришли к выводу, что некоторые аллели (варианты одного гена) могут обладать провоцирующим или защитным действием при сахарном диабете. Например, наличие B8 или B15 в генотипе по отдельности увеличивает риск диабета в 2-3 раза, а совместно - в 10 раз. Присутствие определенных разновидностей генов может увеличивать риск заболевания сахарным диабетом 1 типа с 0,4% до 6-8%.

Счастливые носители B7 болеют диабетом в 14,5 раз реже тех людей, у которых B7 отсутствует. «Защитные» аллели в генотипе также способствуют более мягкому течению болезни в случае, если диабет все-таки разовьется (например, DQB*0602 у 6% больных СД 1 типа).

Правила наименования генов в системе HLA:

Экспрессия гена - это процесс использования генетической информации, при котором информация из ДНК превращается в РНК или белок.

HLA-типирование позволяет установить риск развития сахарного диабета 1 типа. Наиболее информативны антигены HLA II класса: DR3/DR4 и DQ. У 50% больных СД I типа обнаружены HLA-антигены DR4, DQB*0302 и/или DR3, DQB*0201. При этом риск развития болезни возрастает многократно.

HLA-антигены и невынашивание беременности

В комментариях здесь спросили:

У нас с мужем полное совпадение (6 из 6) по HLA второго типа. Есть ли способы бороться с невынашиванием беременности в таких случаях? К кому нужно обращаться, иммунологу?

Одним из иммунологических факторов невынашивания беременности является совпадение по 3 и более общим антигенам HLA II класса. Напомню, антигены HLA II класса находятся преимущественно на клетках иммунной системы (лейкоциты, моноциты, макрофаги, эпителиальные клетки ). Ребенок получает половину генов от отца и половину от матери. Для иммунной системы любые белки, кодируемые генами, являются антигенами и потенциально способны вызывать иммунный ответ. В начале беременности (первый триместр) чужеродные для организма матери отцовские антигены плода вызывают у матери выработку защитных (блокирующих) антител. Эти защитные антитела связываются с отцовскими HLA-антигенами плода, защищая их от клеток иммунной системы матери (натуральных киллеров) и способствуя нормальному протеканию беременности.

Если же у родителей совпадает 4 и более антигена HLA II класса, то образование защитных антител резко снижается или не происходит. В этом случае развивающийся плод остается беззащитным от материнской иммунной системы, которая без защитных антител расценивает клетки эмбриона как скопление опухолевых клеток и старается их уничтожить (это естественный процесс, потому что в любом организме ежесуточно образуются опухолевые клетки, которые ликвидируются иммунной системой). В итоге наступает отторжение эмбриона и выкидыш. Таким образом, для для нормального протекания беременности нужно, чтобы супруги отличались HLA-антигенами II класса. Также существует статистика, какие аллели (варианты) HLA-генов женщин и мужчин приводят к выкидышам чаще или реже.

Перед планируемой беременностью требуется вылечить инфекционно-воспалительные процессы у супругов, потому что наличие инфекции и воспаления активирует иммунную систему.
В первой фазе менструального цикла (на 5-8 день) за 2-3 месяца до планируемого зачатия или программы ЭКО проводят лимфоцитоиммунотерапию (ЛИТ) лимфоцитами мужа (подкожно вводят лейкоциты отца будущего ребенка). Если муж болен гепатитом или другими вирусными инфекциями, используют донорские лимфоциты. Лимфоцитоиммунотерапия наиболее эффективна при наличии 4 и более совпадений по системе HLA и повышает шанс успешной беременности в 3-4 раза.
Во второй фазе цикла (с 16 по 25 день) проводят лечение гормоном дидрогестероном.
На ранних этапах беременности используют методы активной и пассивной иммунизации: лимфоцитоиммунотерапию каждые 3-4 недели донедель беременности и внутривенное капельное введением средних доз иммуноглобулина (15 г в первом триместре). Это мероприятия способствуют успешному протеканию I триместра и снижают риск формирования плацентарной недостаточности.

Таким образом, лечение иммунологического невынашивания беременности должно проходить только в специализированном учреждении (центр невынашивания беременности, отделение патологии беременных и др.) под контролем штатного гинеколога, иммунолога, эндокринолога (гинеколога-эндокринолога). Обращаю внимание, что рядовые гинекологи и иммунологи из других медучреждений могут не иметь достаточной квалификации в этой области.

Ответ подготовлен на основе материала сайта http://bono-esse.ru/blizzard/Aku/AFS/abort_hla.html

Понятие женского иммунологического бесплодия сейчас подвергается сомнению, оно остается предметом научных споров и не рекомендуется к использованию в клинической практике. Подробнее см. комментарии ниже.

комментария 2 к заметке «Что такое HLA и зачем нужно типирование по HLA»

У меня много лет болят суставы, особенно на ногах, Последние годы вообще не могу толком ходить. Но все врачи из года в год говорят только одно: «Ну и что? У всех пожилых ноги болят. У нас тоже! Худеть надо!» Тем самым подозревают меня в излишнем нытье. И никто не посоветовал мне сдать кровь на HLA-B27! Я сама, занимаясь самолечением, сдала его платно и результат положительный. Теперь только врачи сочувственно замолчали! Безобразие! Что за медицина у нас.

Я прочла эту статью и теперь хочу понять, где правда?

HLA и бесплодие

Особенно популярно HLA-типирование в контексте «иммунологического бесплодия». Это и не удивительно, вопрос репродуктивной функции, реализации себя как родителя - очень важный и всегда глубоко эмоциональный. А значит, можно легко сыграть (и заработать) на этом. Есть данные, что от 10 до 36% беременностей прерываются спонтанно на ранних сроках у здоровых женщин в возрасте до 35 лет и после 42 соответственно. Если же беременность после ЭКО, то вероятность неудач еще выше. То есть, если прервалась одна или даже две подряд беременности, вне зависимости от их происхождения, - это не повод искать проблему. Тем более, это не повод говорить о «несовместимости» супругов.

Каково же происхождение этой теории? Исследования на экспериментальных животных в 60-х годах показали, что при спаривании сперматозоиды чаще соединяются с яйцеклеткой при выраженных различиях аллелей генов тканевой совместимости (HLA). В 70-х было обнаружено наличие антигенов HLA на поверхности сперматозоидов человека. Возникло предположение, что часть прервавшихся беременностей у человека связана с близкой гистосовместимостью супругов и были предложены терапевтические методы иммуномодуляции. Наиболее популярным подходом было переливание отмытых лимфоцитов мужа или донора до предполагаемой беременности или же, как вариант пассивной иммунизации, - внутривенное введение иммунноглобулинов (IVIG) в течение беременности.

На протяжении нескольких десятилетий европейские и американские врачи не просто следовали этим теориям, но обобщали свои результаты согласно правилам клинических исследований. Крупнейший мета-анализ 90-х годов (Ober C, et al. 1999) расставил все точки над i: это исследование включало 183 пациентки, было рандомизированным, проспективным, двойным слепым и многоцентровым (все условия достоверности!). Результат оказался потрясающим - в группе контроля, т.е. там где женщинам вводилось плацебо, эффективность «лечения» составила 48%, а в группе, получавших иммунотерапию - всего 36%. То есть, теория однозначно не подтвердилась.

На сегодня ведущие мировые рекомендации, основанные на доказательствах, гласят: «HLA - типирование, выявление цитотоксических антител против антигенов мужа и иммунотерапия не могут быть рекомендованы для обследования супружеских пар с невынашиванием беременности».

Это и понятно, учитывая то количество аллельных форм HLA-комплекса, о котором нам известно теперь. Реальное количество прервавшихся беременностей по иммунологической причине очень и очень мало. И даже если такой случай и был (хотя достоверно доказать его просто не возможно), это не является правилом для каждой беременности у данной пары. Поскольку вариантов комбинаций аллелей чрезвычайно много! И у следующего ребенка такая комбинация может быть даже очень благоприятной.

Так что, грустно наблюдать, как процветают не оправдавшиеся теории. И особенно если учесть, на основании каких анализов делают грандиозные выводы про HLA-совпадения. Практически невозможно провести полное HLA-генотипирование супругов, поскольку объем исследования был бы колоссален. Результаты, которые выдают в лабораториях, является очень приблизительным и очень усеченным вариантом типирования. Оценка совпадений генотипов супругов по таким результатам равноценна гаданию на кофейной гуще. И ладно бы ограничится громкой теорией про причину невынашивания, но главная опасность лишних анализов - лишнее псевдотерапевтическое вмешательство.

К началу 2000-х были детально проанализированы все иммунологические теории невынашивания и разные методы их коррекции. Вот окончательный вывод, основанный на многочисленных статистически достоверных исследованиях:

«Ни иммунизация лейкоцитами мужа, ни внутривенное введение иммуноглобулинов не увеличивает частоту родов у женщин с необъяснимыми повторными выкидышами. Такое лечение является дорогостоящими и имеет потенциально опасные побочные эффекты. Недопустимо подвергать женщин дополнительному чувству утраты, связанному с ложными ожиданиями от неэффективного лечения. Кроме того, лабораторные тесты, которые направлены на выявление показаний к иммунотерапии не имеют прогностического значения для исходов беременности и не должны применяться».

Давайте же прислушаемся к выводам, полученным тяжелым опытом других. Не будем наступать на те же грабли.

Исследование для выявления предрасположенности к заболеваниям из группы серонегативных спондилоартритов, в ходе которого с помощью метода проточной цитометрии определяется антиген HLA-B27.

Синонимы русские

Человеческий лейкоцитарный антиген B27
Иммуногенетический маркер HLA-B27
Дифференциальная диагностика аутоиммунных заболеваний

Синонимы английские

HLA typing, flow cytometry (flow cytofluorometry)
Ankylosing spondylitis Histocompatibility Antigen
Ankylosing spondylitis Human Leukocyte Antigen

Метод исследования

Проточная цитометрия.

Какой биоматериал можно использовать для исследования?

Венозную кровь.

Как правильно подготовиться к исследованию?

Исключить из рациона алкоголь в течение 24 часов до исследования.
Не принимать пищу в течение 12 часов до исследования.
Полностью исключить прием лекарственных препаратов в течение 24 часов перед исследованием (по согласованию с врачом).
Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение в течение 24 часов до исследования.
Не курить в течение 30 минут до исследования.

Общая информация об исследовании

Для чего используется исследование?

Для дифференциальной диагностики суставного синдрома (серонегативных спондилоартритов, ревматоидного и септического артрита, подагры и других);
для скрининга, диагностики и прогноза анкилозирующего спондилоартрита;
для оценки риска развития атлантоаксиального подвывиха при ревматоидном артрите.

Когда назначается исследование?

При суставном синдроме: асимметричный олигоартрит, особенно в сочетании с болью в поясничной области воспалительного характера (утренняя скованность более 1 часа, улучшение при физической нагрузке, ухудшение в ночное время суток) и признаки энтезита;
при отягощенном наследственном анамнезе по анкилозирующему спондилоартриту;
при ревматоидном артрите.

Что означают результаты?

Наличие антигена HLA-B27:

наблюдается у 90-95% пациентов с анкилозирующим спондилоартритом и ювенильным анкилозирующим спондилоартритом, а также у 60-90% с реактивным артритом и 50% с псориатической артропатией;
наблюдается у 7-8% здоровых людей европейской популяции.

Отсутствие антигена HLA-B27:

Ревматолог, хирург, врач общей практики, мануальный терапевт.

Литература

Darke C, Coates E. One-tube HLA-B27/B2708 typing by flow cytometry using two «Anti-HLA-B27» monoclonal antibody reagents. Cytometry B Clin Cytom. 2010 Jan;78(1):21-30.
Seo BY, Won DI.Flow cytometric human leukocyte antigen-B27 typing with stored samples for batch testing. Ann Lab Med. 2013 May;33(3):174-83.
Seipp MT, Erali M, Wies RL, Wittwer C. HLA-B27 typing: evaluation of an allele-specific PCR melting assay and two flow cytometric antigen assays. Cytometry B Clin Cytom. 2005 Jan;63(1):10-5.
Levering WH, Sintnicolaas K, Wind H, Hooijkaas H, Gratama JW. Flow cytometric screening for the HLA-B27 antigen on peripheral blood lymphocytes. Curr Protoc Cytom. 2005 Aug;Chapter 6:Unit6.22. doi: 10.1002/0471142956.cy0622s33.

Полиморфизм генов HLA-комплекса необычайно высок и широкое внедрение в иммуногенетику методов молекулярной биологии приводит к дальнейшему расширению перечня аллельных вариантов исследуемых генов. Этот процесс с одной стороны затрудняет адекватный подбор полностью совместимых пар донор-реципиент для трансплантации, но с другой стороны позволяет проводить эту процедуру с максимальной эффективностью. Уточнение истинного аллельного полиморфизма генов главного комплекса гистосовместимости может способствовать и установлению их более выраженной ассоциированности с заболеваниями, т.к. становится понятным, что установленные на первом этапе развития клинической иммуногенетики ассоциативные связи предрасположенности к различным болезням с серологически выявляемыми широкими специфичностями, носили предварительный характер и подлежат детальному уточнению на современном этапе развития науки.

К настоящему моменту число идентифицированных аллелей генов HLA-комплекса приближается к одной тысяче и продолжает расти.

Необходимо отметить, что механизмы ассоциированности HLA антигенов с заболеваниями до сих пор полностью не расшифрованы. Они несомненно связаны с непосредственным участием этих уникальных молекул, локализованных на клеточных мембранах, в формировании межмолекулярных комплексов, приводящих к избирательной специфической активации клонов иммунокомпетентных клеток со специализированными функциями. Существование множественных путей формирования иммунопатологических процессов снижает значимость отдельно взятых факторов, что находит свое отражение в относительном характере ассоциированности HLA антигенов с заболеваниями.

В 1973 году выявлено увеличение частоты встречаемости антигена HLA-B27 у больных анкилозирующим спондилоартритом. Этот факт дал толчок для развития направления клинической иммуногенетики «HLA и болезни». В рамках этого направления было установлено, что целый ряд тяжелых заболеваний человека ассоциирован с наличием в его геноме тех или иных аллельных вариантов HLA-генов. Существуют также HLA-антигены, определяющие резистентность их носителей к развитию данного заболевания – протективные антигены.

Установлена ассоциация антигенов HLA-B8 с заболеваниями аутоиммунной природы, в частности с системной красной волчанкой - HLA-B7, -B8, -B17, -DR2, -DR3, ассоциации антигенов – HLA-А3-В17, протективные антигены при этом заболевании - HLA-A11, B15 и В35.

Чаще других выявляется антиген HLA-B8 при дерматомиозите, хроническом вирусном гепатите В.

Антиген HLA-В35 ассоциирован с развитием сахарного диабета I типа.

При гипертрофической кардиомиопатии имеется ассоциация с антигенами гистосовместимости HLA-B23, -B12, -DR4.

При ревматоидном артрите отмечается ассоциация заболевания с антигеном HLA-DR4, при болезни Рейтера – с антигеном HLA-В27.

Доказана ассоциация антигена HLA-В17 с острым лимфобластным лейкозом.

Положительная корреляционная взаимосвязь при ВИЧ-инфекции выявлена с антигенами HLA-А1, -А5, -А11, -А23, -А28, -А29, -DR2, -DR5, а также с ассоциациями антигенов HLA-В8-DR3, D35-Cw4. Отрицательная связь - с HLA-A9, -A25, -A26, -A32, -B4, -B14, -B18, -B27, -B51, -B57, -DR5, -DR6, -DR7, -DR13.

При рассеянном склерозе – ведущая роль принадлежит антигену HLA-DR2, ремиттирующее течение ассоциировано с HLA-DRw17, DQw2, прогредиентное течение - с HLA-B7, -B8, DR3, неблагоприятный прогноз и тяжелое течение - с HLA-DR4, -DR7, -DQw8, -DR17, -DQ2, -DR1, -DQ5, благоприятный прогноз - с HLA-DQw5.

Предрасполагающими факторами при лимфогранулематозе являются HLA-Cw7, -DR5, -DR6, протективные антигены - HLA-DR1, -DR7.

Выявление этих антигенов на доклиническом этапе заболевания позволяет отнести пациента к группе риска по развитию того или иного заболевания, а при появлении первых клинических симптомов способствует ранней дифференциальной диагностике.

ПОПУЛЯЦИОННАЯ ИММУНОГЕНЕТИКА исследует вопросы происхождения и расселения человечества по планете. Была составлена генетическая модель родословного дерева человечества, подтвержденная независимыми исследованиями археологов и лингвистов на основе анализа памятников культуры и языков на различных континентах.

Исследованиями иммуногенетиков были получены данные об африканском происхождении человеческого вида. Учитывались варианты расчета минимального генетического пути, скорость эволюционных изменений и соотнесение длины ветвей генетического дерева с продолжительностью хронологического промежутка по многим полиморфным генетическим системам. Африканское происхождение человечества подтверждено анализом митохондриальной ДНК, наиболее дифференцированной в Африке в сравнении с другими континентами. Сопоставление этих данных с результатами палеонтологических и археологических исследований показало, что человечество, возникнув 200 тыс. лет назад в Африке постепенно мигрировало через Суэцкий перешеек и заселило Европу и Азию, откуда волны миграции достигли Америки через сухопутный тогда Берингов пролив и Австралии через острова Тихого океана после развития мореплавания.

Важным аспектом иммуногенетики является популяционный анализ распределения HLA-антигенов в различных этнических группах. Установлены расовые различия распределения HLA-антигенов: HLA-A1 преобладает у представителей белой расы, HLA-A24 и HLA-B54 – у представителей желтой расы, для которой нехарактерно наличие антигенов HLA-A25, HLA-B8 и В18.

Международные программы по популяционной имуногенетике позволили сопоставить распределение HLA-антигенов среди отдельных современных народов всех континентов. Распределение HLA-антигенов в типичных для Европы и Азии популяциях представлено в таблице 3.

Таблица 3

Частота распределения HLA-антигенов среди

некоторых этнических групп Европы и Азии

(по данным 11-го уоркшопа по гистосовместимости, 1991)

Представляет большой интерес из-за высокой ассоциативной связи ее отдельных антигенов с ревматическими болезнями, что, по-видимому, обусловливает участие этих антигенов в патогенетических механизмах и индукции сложного аутоиммунного процесса. Из 40 обнаруженных ассоциаций антигенов HLA при различных болезнях 18 наблюдались при ревматических заболеваниях. Система HLA располагается на коротком плече хромосомы 6. Согласно последней номенклатуре (1991 г.), в эту систему входят генные области (локусы) А, В, С, Е, F, G, которые относятся к классу 1, и локусы DR, DQ, DP, DQB, DNA, объединенные в класс II. Помимо локусов, непосредственно входящих в систему HLA, выявлены гены, соседствующие или картирующиеся внутри данной системы. К ним относятся гены фактора пропердина (Bf), гены, кодирующие синтез ферментов глиоксалазы (GL0), фосфоглюкомутазы 3 (PG М3), пепсиногена 5 (PG 5), 21-гидроксилазы (21-ОН), структурные гены факторов комплемента (С2, С4А, С4В), а также гены, детерминирующие синтез опухоленекротизирующего фактора (TNFα и TNFβ).

Гены, кодирующие антигенные специфичности классов I и II системы HLA, наследуются кодоминантно и отличаются высокой степенью полиморфизма. Так, с помощью молекулярных методов исследования тестируют 41 аллельный вариант генов локуса А, 61- локуса В, 18 - локуса С, 69 - локуса DR, 33 - локуса DQ и 46 локуса DP. Антигены класса I экспрессируются преимущественно на мембранах всех ядросодержащих клеток, в то время как антигены класса II имеют более ограниченное тканевое распределение и присутствуют на поверхности иммунокомпетентных клеток - макрофагов, В-лимфоцитов, дендритических клеток, активированных in vitro или in vivo Т-лимфоцитов.

Комплекс полиморфных HLA-молекул играет центральную иммунорегуляторную роль в развитии иммунного ответа.

Выраженный полиморфизм позволяет системе HLA обеспечивать механизмы защиты организма от чужеродных агентов, в том числе микробного или вирусного происхождения.

Наиболее значительная ассоциативная связь обнаружена в 1973 г. между антигеном В27 и анкилозирующим спондилоартритом (болезнь Бехтерева). Частота наблюдений этого антигена при данном заболевании составляет 80-95% (в популяции 7-9 %).

В дальнейшем была выявлена связь антигена В27 с "ассоциированными ревматическими заболеваниями" - с синдромом Рейтера (70-90%), псориатическим спондилитом (50%), спондилоартритом при болезни Крона (50%), реактивными артритами различной этиологии (сальмонеллезные, иерсиниозные, хламидийные). Антиген В27 встречается очень часто при воспалительных заболеваниях суставов с одновременным поражением крестцово-подвздошных сочленений (сакроилеит), и наличие этого антигена в этих случаях рассматривают как

Дополнительный диагностический критерий.

Относительный риск (RR) развития заболеваний при наличии антигена В27 очень велик и колеблется от 141% - При анкилозирующем спондилоартрите до 15,7-55,5% при других "В27-ассоциированных заболеваниях".

Прослеживается связь отдельных клинических вариантов болезней с определенными антигенами системы HLA, что свидетельствует о генетической гетерогенности заболеваний. Так, псориатический периферический артрит чаще ассоциируется с антигеном CW6 (RR=15,7), В16 (RR=4,9) и в меньшей степени с В17, В13, В37. В то же время псориатический спондилит имеет высокую ассоциативную связь с HLA-B27 (RR=15,7), В16 (RR=6,4), В13 (RR=5,7) и более низкую - с CW6 и В17. Псориаз ассоциируется с наличием CW6 (RR=15,7).

Ювенильный хронический артрит, развивающийся по типу спондилоартрита, и с явлениями острого переднего увеита связан с наличием в фенотипе HLA В27 (RR=141); это же заболевание, протекающее с признаками олигоартритов, ассоциировано с DR8 (RR=7,4) и DR5 (RR=2,3).

Значительная ассоциативная связь с HLA DP4 обнаружена при ревматоидном артрите: частота наблюдений этого антигена у таких больных превышает в 2-3 раза таковую в популяции - 20% (RR=6-12). Применение новейших методов молекулярной биологии показало, что ревматоидный артрит ассоциирован лишь с двумя аллельными вариантами -DR4- DW4 и DW14 (по новой номенклатуре - DRB1*0401 и DRB1*0404). Обнаружено, что DR4 при ревматоидном артрите ассоциируется с тяжестью болезни, степенью эрозивного процесса в суставах, половым диморфизмом, семейной агрегацией заболевания. Выявление ассоциации ревматоидного артрита с В40, В15, CW3, DQW3 объясняется феноменом неравновесия по сцеплению этих антигенов с HLA DR4. Осложнения (протеинурия, иммунная тромбоцитопения) при лечении золотом или d-пеницилламином развиваются часто при наличии антигена DR3 в фенотипе больных ревматоидным артритом.

С наличием антигена DR3 связывают также развитие многих аутоиммунных заболеваний, в частности СКВ (RR=2,5). Предполагают, что наличие DR3 предрасполагает к развитию анти-Ro (SS - А) и анти-La (SS- В) - антительному ответу, в то время как наличие HLA-DR2 вызывает только анти-Ro (SS- А)-ответ.

Аналогичные данные относительно антительного ответа получены при синдроме Шегрена. Кроме того, более высокое содержание анти-Ro (SS - А)-антител наблюдается у пациентов-гетерозигот DQW1/DQW2. В случае, если синдром Шегрена является самостоятельным заболеванием, то оно бывает ассоциировано с DR3 DRW52; если же данный синдром является вторичным, например при ревматоидном артрите, более сильная ассоциативная связь наблюдается с DR4, хотя связь с вышеперечисленными антигенами также существует.

Болезнь Бехчета связана с наличием антигена 1 класса В5 (RR=12,4).

Имеются неоднозначные данные о наличии ассоциативных связей с антигенами системы HLA при склеродермии. У таких больных обнаруживают ассоциации с DR3 (RR=4,5), DR1 (RR=2,2), DR5 (RR=2,6-5).

Причины, вызывающие ассоциацию маркеров с заболеванием, разнообразны: общесемейные и общегрупповые средовые факторы, плейотропное действие гена, неравновесность по сцеплению и др.

Механизм участия HLA в возникновении и развитии ревматических болезней неясен. Так, для объяснения связи болезни Бехтерева с наличием HLA-B27 выдвинуты 2 теории - одного гена и двух генов. Согласно теории одного гена, HLA-B27 непосредственно вовлечен в патологический процесс либо посредством его функции как Т-клеточного рестриктирующего элемента, либо вследствие структурных особенностей, обусловливающих его дисфункцию. При этом рассматривается несколько гипотетических вариантов (гипотеза "молекулярной мимикрии", рецепторная, структурная микрогетерогенность подтипов HLA-B27, гипотеза "артритогенного пептида" и др.). Согласно теории двух генов, ген HLA-B27 находится в неравновесном сцеплении с каким-то другим геном, расположенным на коротком плече хромосомы 6, продукты которого каким-то образом вызывают болезнь. Однако современные молекулярные методы не позволили выявить в регионе HLA ген, детерминирующий заболевание. Ни одна из предложенных гипотез не может в настоящее время полностью объяснить эту ассоциативную связь. Есть основания предполагать, что гены HLA являются скорее генами-"модификаторами" главного или главных генов заболевания, которые могут располагаться не только на хромосоме 6, но и на других. В то же время участие системы HLA в формировании предрасположенности к воспалительным ревматическим болезням не вызывает сомнения.

» , » HLA-B27 антиген

HLA-B27 антиген

51220
Дата публикации: Февраль 5, 2013

HLA-B27 является анализом крови, при котором можно обнаружить белок, который обнаруживается на поверхности белых кровяных клеток. Этот белок называется человеческим лейкоцитарным антигеном B27 (HLA-B27). Лейкоцитные человеческие антигены (HLAs) являются белками, которые помогают иммунной системе организма определять разницу между своим клеткам и инородными, вредными веществами. Ваш врач может назначить этот тест, если у вас боли в суставах, скованность, или опухоль. HLA B27 тип связан с аутоиммунными заболеваниями, такими как анкилозирующий спондилит и синдром Рейтера. Испытание может быть сделано вместе с другими тестами, в том числе:

С-реактивный белок
Скорость оседания эритроцитов
Ревматоидный фактор
Рентген

HLA антигенное тестирование также используется в соответствии с донорской тканью у человека. Например, это может быть сделано, когда человек нуждается в пересадке почки или в пересадке костного мозга.

Нормальные результаты

Нормальный (отрицательный) результат означает, что HLA-B27 отсутствует.

Что а номальные результаты означают,

Положительный тест означает, что HLA-B27 присутствует. Он предпологает больший, чем в среднем риск развития определенных аутоиммунных заболеваний. Аутоиммунные расстройства являются состоянием, которое возникает, когда иммунная система ошибочно атакует и разрушает здоровые ткани организма. Аномальный результат может быть вызван:

Анкилозирующим спондилоартритом
Артритом, связанным с болезнью Крона
Реактивным артритом
Сакроилеитом (воспаление крестцово-подвздошного сочленения)
Увеитом

Если есть симптомы или признаки аутоиммунных заболеваний, положительный HLA-B27 тест может подтвердить диагноз. Тем не менее, HLA-B27, как правило, находятся в небольшом количестве у кавказцев и не всегда значит, что у них может быть заболевание.